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lmcyjxs金蟲 (正式寫手)
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[求助]
急，請(qǐng)大家?guī)蛶兔�，可以室溫沉淀RNA嗎？
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問題如題，我前天用CTAB法提RNA，抽提溶液自制，LiCL沉淀RNA -20℃冰箱沉淀4小時(shí)后無沉淀，我覺得是失敗了（其實(shí)也可能沒，只是當(dāng)時(shí)我不知道RNA是無色膠狀的沉淀，以為是肉眼清晰可見的白色沉淀，查了資料才知道可能是這樣的）就想不要了，后放于室溫，過了兩天，發(fā)現(xiàn)有白色絮狀沉淀了，先又放回了-20℃冰箱凍著。 現(xiàn)在我想問，這些可能是RNA嗎？RNA的沉淀都是無色膠狀的嗎？ 請(qǐng)各位高手指點(diǎn)，小妹初次接觸這行，已經(jīng)提過兩次了，都是一樣的情況，心里面好失落�。⊙劭凑麄�(gè)暑假就差不多過去了，俺還不能回家，沒做成績(jī)出來的話，還怎么混啊  |
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2樓2012-08-06 09:39:56
殘?bào)?/a>
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3樓2012-08-06 11:30:21
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lmcyjxs: 回帖置頂 2012-08-08 10:32:46
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能否繼續(xù)請(qǐng)教一下一些細(xì)節(jié)問題？ 1、溶液的配制，用于提RNA的tris溶液你是用DEPC滅菌水配的嗎？還是直接去離子水配的？這些用來裝各溶液的瓶子你有沒有用DEPC水浸泡過？ 2、那些tips和離心管我只用了高壓高溫滅菌，沒有用DEPC水浸泡過，這樣會(huì)很影響實(shí)驗(yàn)嗎？你在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候有用DEPC水泡過嗎？ 3、配制CTAB-tris溶液時(shí)，里面一些試劑的添加入順序有影響嗎？ 4、你看到的RNA沉淀是什么樣的呢？不是無色透明的膠狀沉淀嗎？ 5、提RNA的時(shí)候，你覺得最關(guān)鍵的步驟在于哪里？ 我初次接觸這些，提過3次了，都感覺看不到沉淀，也不知道是不是試劑的問題，還是操作的問題。。。對(duì)于以上問題，很希望可以交流交流！謝謝啦 |
4樓2012-08-07 22:48:29
chenguestc
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5樓2012-08-08 00:02:06
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6樓2012-08-08 00:34:43
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