 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3027 | 回復(fù): 4 | ||
pyflxxx新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
有關(guān)提取全血DNA和RNA問題。 已有1人參與
|
|
|
你好，本人新人，即將開始提取人全血RNA和DNA。 DNA用tiangen的盒子，RNA用TRIZOL提取。 DNA用于SNP基因分型。RNA用于做些病原學(xué)檢測。 想請問：用于提取DNA的全血需要加多少ml樣本量才夠？ RNA呢？ 另外同時提取實在分身無術(shù)，如果第一天提取RNA，凍-80里，第二天再提取DNA有影響嗎？ RNA反轉(zhuǎn)錄和組織試劑反轉(zhuǎn)錄是一樣的么？ 謝謝了。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有112人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請教RNA提取高手：反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已經(jīng)有18人回復(fù)
- RNA 提取的一些問題，請大家?guī)兔卮?/a>
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 動植物樣品的采集及DNA樣品的提取(ZT)
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 全血基因組的提取問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于RNA提取的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用無菌注射用水代替？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 提取RNA時，為何會有DNA條帶，并且有且只有一條帶？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨嗎？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】異硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA殘留問題~回帖就送幣�。�！
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取質(zhì)量驗證及反轉(zhuǎn)后cDNA質(zhì)量驗證問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】試劑盒提不出RNA，求救啊
已經(jīng)有39人回復(fù)
- 【求助/交流】RNA的提取問題和qRT-PCR分析基因在不同時間的定量表達
已經(jīng)有10人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking(金幣+3): 鼓勵積極應(yīng)助！ 2011-12-22 18:29:52
amisking: 回帖置頂 2011-12-22 18:29:54
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking(金幣+3): 鼓勵積極應(yīng)助！ 2011-12-22 18:29:52
amisking: 回帖置頂 2011-12-22 18:29:54
|
你可以參考一下Qiagen 有關(guān)blood DNA 的kit 里面有介紹。 如200ul 全血的DNA產(chǎn)量在5-12ug左右。而1ml 的新鮮全血RNA含量在1-3ug左右�？茨愫罄m(xù)實驗需要的用量決定使用多少全血，不過血液的核酸含量也會因人而有所差異，再加上所使用的提取方法也有一個效率問題，如果血液充足建議多用一點。 如果你的血液是加了抗凝劑的，第一天提RNA，剩余的血液可以放4度冰箱，第二天用來提DNA完全沒問題。因為血液成份復(fù)雜，且其中的RNA含量少，所以采血后請盡快提RNA。不過你說用Trizol提可能會受體積限制（1ml Trizol處理100ul液體）。 |
3樓2011-12-22 17:00:09
pyflxxx
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 199.6
- 帖子: 116
- 在線: 8.7小時
- 蟲號: 1351513
- 注冊: 2011-07-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 流行病學(xué)方法與衛(wèi)生統(tǒng)計
2樓2011-12-22 13:36:36
4樓2011-12-22 17:09:37
【答案】應(yīng)助回帖
| Trizol可以用于提取RNA,但是屬于化學(xué)試劑，具有一定的毒性。Trizol和全血樣本的比例是1:1，也可以稍多加一些Trizol，少加些血�；靹蛑蠓胖�10分鐘左右，直接加三氯甲烷混勻再去離心，可以不用先離心去沉淀之后再加三氯甲烷。我們實驗室用BIOG RNA BLOOD ISOLATE KIT離心技術(shù)提取RNA比Trizol要簡便些,樓主需要注意如果用Trizol每個步驟操作要快，用的時間藥短些，防止RNA降解,異丙醇沉淀的時候，放-20°C的冰箱半個小時，或再適當(dāng)延長一點時間。迅速離心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易損失部分RNA。不要過分干燥，管內(nèi)稍有點殘余的乙醇也沒關(guān)系。干燥一會就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反轉(zhuǎn)錄成cDNA再保存。還有你說的第一天提取RNA，凍-80里，第二天再提取DNA我個人覺得是沒什么影響 |
5樓2019-03-21 09:08:32
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 pyflxxx 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 招08考數(shù)學(xué) +3 | laoshidan 2026-03-20 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +4 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +4 | z1z2z3879 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +5 | 金恩貝 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠心求調(diào)劑 +11 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿深大，0703化學(xué)，總分302，求調(diào)劑 +4 | 七月-七七 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +9 | 申子申申 2026-03-19 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +3 | 李軼男003 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑0854 +3 | assdll 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+8
|
.6lL 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +6 | www_q 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +9 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過四六級求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +3 | 妮妮ninicgb 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|