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安安90木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：RNA提取
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| 求助：今天提取的RNA260/280在1.95-2.05之內(nèi)，但是260/230有的1.2-1.4，也有的是1.9-2.2，接下來要進行反轉(zhuǎn)錄做相對熒光定量，這可以用嗎？O(∩_∩)O謝謝 |
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xipha
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2013-11-13 12:39:52
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2013-11-13 12:39:52
| 不確定樓主提取的是總RNA還是什么，但是以定量PCR而論，我記得我們組之前都不大看OD的，因為如果提出來質(zhì)量不好的RNA 測OD也有可能正常。一般需要跑個電泳，用聚丙烯酰胺膠（分辨率比較高，瓊脂糖應(yīng)該也可以吧），只要分離相，TBE制膠TBE緩沖，上樣孔看看蛋白多不多，RNA完整不完整（這個最重要），有沒有分解的現(xiàn)象。好的RNA一般是一條連續(xù)的亮帶，根據(jù)物種不同，核糖體RNA有一個亮度比例，一般電泳跑出來條帶不正常的做實驗常常會得到錯誤的結(jié)果。這個很久沒做了，細節(jié)都忘光光了，不過應(yīng)該可以查得到，希望有幫助。 |
2樓2013-11-13 02:33:03
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3樓2013-11-13 06:16:09
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4樓2013-11-13 10:56:11
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5樓2013-11-13 10:56:49
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6樓2013-11-13 13:45:32
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7樓2013-11-13 14:17:59
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8樓2013-11-14 19:52:37
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