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安安90木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：RNA提取
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| 求助：今天提取的RNA260/280在1.95-2.05之內(nèi)，但是260/230有的1.2-1.4，也有的是1.9-2.2，接下來要進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄做相對(duì)熒光定量，這可以用嗎？O(∩_∩)O謝謝 |
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安安90
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4樓2013-11-13 10:56:11
xipha
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【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-11-13 12:39:52
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-11-13 12:39:52
| 不確定樓主提取的是總RNA還是什么，但是以定量PCR而論，我記得我們組之前都不大看OD的，因?yàn)槿绻岢鰜碣|(zhì)量不好的RNA 測(cè)OD也有可能正常。一般需要跑個(gè)電泳，用聚丙烯酰胺膠（分辨率比較高，瓊脂糖應(yīng)該也可以吧），只要分離相，TBE制膠TBE緩沖，上樣孔看看蛋白多不多，RNA完整不完整（這個(gè)最重要），有沒有分解的現(xiàn)象。好的RNA一般是一條連續(xù)的亮帶，根據(jù)物種不同，核糖體RNA有一個(gè)亮度比例，一般電泳跑出來?xiàng)l帶不正常的做實(shí)驗(yàn)常常會(huì)得到錯(cuò)誤的結(jié)果。這個(gè)很久沒做了，細(xì)節(jié)都忘光光了，不過應(yīng)該可以查得到，希望有幫助。 |
2樓2013-11-13 02:33:03
zuoqi
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3樓2013-11-13 06:16:09
安安90
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5樓2013-11-13 10:56:49
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