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秦俊超527新蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)松蔭《土壤酶及其研究法》中磷酸酶活測(cè)定中的一點(diǎn)困惑 已有2人參與
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在根據(jù)關(guān)松蔭的方法測(cè)磷酸酶活的時(shí)候，采用磷酸苯二鈉比色法1，實(shí)驗(yàn)原理是根據(jù)苯酚與氯代二溴對(duì)苯醌亞胺試劑反應(yīng)顯色，但是我按照觀松蔭方法實(shí)驗(yàn)并沒顯色，做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)是一條水平線。求解釋，求解決方法。 |
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5樓2015-06-02 12:06:31
calorimetry
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3樓2015-06-01 13:10:17
秦俊超527
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不是沒有酶活性。 根據(jù)關(guān)松蔭的方法，我測(cè)土壤磷酸酶的活性。采用磷酸苯二鈉比色法1.原理是磷酸苯二鈉在磷酸酶的酶促反應(yīng)下產(chǎn)生酚，酚與顯色劑2，6-二溴苯醌氯酰亞胺反映顯色。做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)不同濃度的酚與顯色劑反應(yīng)，顯色，比色，得到與濃度相應(yīng)的吸光度值�，F(xiàn)在的問題是在做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，該有的顯色沒有，比色時(shí)，不同濃度的酚溶液，吸光度值一樣。所以樣品測(cè)量就進(jìn)行不下去。 之后我又用了關(guān)松蔭的磷酸苯二鈉比色法二，主要區(qū)別就是顯色劑改了，在做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，顯色明顯，但是比色時(shí)吸光度變化很快，因而測(cè)出的值沒有意義。在較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)（一天），顏色變化從紅變黃再變綠。 這是我畢業(yè)論文的一部分，都快愁死了，很需要幫助，請(qǐng)前輩賜教。 |
4樓2015-06-01 18:01:28
秦俊超527
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6樓2015-06-02 12:11:38
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