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[求助]
脂質(zhì)體liposome制備時遇到的苦難，膜過濾問題 已有2人參與
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請教大俠， 現(xiàn)在按Biacor （SPR儀器公司）的要求制作脂質(zhì)體，用的是Avanti提供的lipid，濾膜和小過濾設(shè)備。 實驗要求50nm濾膜，但我做的脂質(zhì)體很難通過。給多大壓力都不通過，壓力過大膜就破掉了。 本實驗步驟如下： 稱取76mg POPC溶于10ml氯仿， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)蒸出氯仿，然后真空泵旋蒸2h。 得到的一層薄膜用緩沖溶液溶解，混懸， 放到液氮里冷凍，再解凍，反復(fù)5次。 混懸液用注射器在過濾裝置上透過50nm濾膜。 此時遇到問題，因為50nm根本過不去，我就先用100nm膜過濾，但還是過不去。像堵住了一樣，使勁推也不進(jìn)行最后膜就破掉了。 1.以為是脂質(zhì)體體積太大了，我就將混懸液稀釋了3倍。 2.想讓脂質(zhì)體均勻，我又用超聲波超聲了5min 但結(jié)果無濟(jì)于事。 請有經(jīng)驗的大俠們告訴我一下，以上步驟是不是哪兒出了問題。或者該怎么做才對，謝謝大家！ |
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calorimetry
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