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ginaduan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
OPA試劑為什么要現(xiàn)配先用?配好之后最多放多久?各個(gè)成分的作用是什么? 已有1人參與
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用OPA法測(cè)接枝度,有以下想問的問題: 1.OPA試劑為什么要現(xiàn)配先用?配好之后最多放多久?(半個(gè)小時(shí)沒問題吧?) 2. 各個(gè)成分的作用是什么? 3. OPA固體溶解到甲醇溶液中,顏色變成粉紅色,正常嗎?加入其他試劑,配成完整OPA試劑又變成了無色透明。 求助大神解答一下? |
版主 (文壇精英)
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1、OPA試劑本身容易氧化降解(由無色透明變成微黃色),造成實(shí)際工作試劑保存困難。OPA的不穩(wěn)定主要是因?yàn)樗菀妆豢諝庵械难鯕馑趸瑥亩l(fā)生降解。配好的OPA試劑在4℃黑暗條件下可穩(wěn)定存放1周,能較好地解決了OPA試劑易降解的問題;OPA與氨基酸的衍生產(chǎn)物也不穩(wěn)定,衍生后需立即進(jìn)樣分析。 2、鄰苯二甲醛(OPA)本身不發(fā)熒光,色譜分離中不會(huì)形成干擾峰,在2-巰基乙醇存在下與第一級(jí)氨基酸迅速反應(yīng)生成1-硫代-2-烷基異吲哚,加成物可產(chǎn)生熒光,在紫外區(qū)有較強(qiáng)吸收。甲醇溶解OPA,硼砂緩沖液控制衍生反應(yīng)體系為堿性(反應(yīng)條件)。 3、是正,F(xiàn)象。 |

新蟲 (初入文壇)
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Opa溶到甲醇中變粉色,表明試劑已被仲氨污染,應(yīng)廢棄重配。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵蟲 (初入文壇)

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