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Cindycclove新蟲 (小有名氣)
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[交流]
DOP-PCR相關(guān)問題咨詢
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最近用隨機(jī)引物擴(kuò)增基因組DNA，有幾個(gè)問題不太明白 1.我的引物只有一條，5‘端有酶切位點(diǎn)BamHI，中間是錨定堿基，最后是6個(gè)隨機(jī)堿基。想請問大家，我擴(kuò)增出來的片段，是雙鏈嗎？那么兩端都是有BamHI位點(diǎn)嗎？為什么？ 2.BamHI是為了使載體和片段連接，如果只有一端有BamHI位點(diǎn)，不是就連接不上了？ 3.轉(zhuǎn)化以后提取質(zhì)粒，有大于4000BP(質(zhì)粒3000bp，目的片段在1000-3000不定）的產(chǎn)物，我想雙酶切鑒定，如何選取酶切位點(diǎn)呢？BamHI然后再選取載體上任意一個(gè)酶切位點(diǎn)嗎? 謝謝大家~ |
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