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kika8014

金蟲 (正式寫手)

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專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)

[求助] 粘多糖發(fā)酵，產(chǎn)物蛋白含量超標(biāo)是什么原因造成的呢？已有1人參與

各位蟲友大神，做透明質(zhì)酸發(fā)酵，一種粘多糖，培養(yǎng)基成分包括酵母浸粉，蛋白胨，無機(jī)鹽等，發(fā)酵完成后，用乙醇沉淀提取純化，現(xiàn)在有個(gè)問題，使用有的廠家浸粉，成品透明質(zhì)酸含量超過0.1%，超過國標(biāo)，而有的廠家浸粉就沒有這個(gè)問題。浸粉添加量也就0.5%左右，后面還有乙醇沉淀除去蛋白，影響有這么大嗎？

考慮了一下，是不是與浸粉肽段分布有關(guān)，可能一定分子量的肽段醇沉淀除不干凈，或者與產(chǎn)物結(jié)合了？？還有另外的可能就是類似于核酸蛋白類的蛋白復(fù)合體？？

請各位專家給點(diǎn)意見唄，想研究一下

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車到山前必有路

1樓 2015-07-08 10:50:24

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

stephen1102

金蟲 (正式寫手)

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專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

發(fā)酵過程：培養(yǎng)基成分會(huì)影響HA的蛋白殘留的，發(fā)酵過程的培養(yǎng)基最好要保持相同廠家的，如果有條件建立個(gè)物料放行標(biāo)準(zhǔn)（自己內(nèi)部制定）；純化過程：0.1%的標(biāo)準(zhǔn)其實(shí)很好實(shí)現(xiàn)，依靠乙醇沉淀可以去除絕大部分蛋白，但不能完全去除，可以嘗試多步醇沉，或者增加純化步驟（超濾，活性炭脫色、樹脂吸附等）均能有效降低蛋白含量；分析部分：對于蛋白含量＜0.1%，一般分析方法穩(wěn)定性不好，不知道你們是采用什么檢測方法的，所以存在有些批次合格有些批次不合格，不妨驗(yàn)證下你們分析方法。

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回復(fù)此樓

戒驕戒躁，做好自己

2樓2015-09-28 10:40:10

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