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wo農(nóng)民新蟲 (初入文壇)
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[交流]
ATPase Km值得測定，前面幾個(gè)點(diǎn)反應(yīng)速率上不去，Km值很高！！
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大家好小弟最近在做一個(gè)ATPase Km值的測定，但是測得的前面幾個(gè)低濃度的反應(yīng)速率上不去，得出的Km值很高，比同源的酶高10-20倍，graphpad繪圖近似一條斜線，只有偶爾會是矩形雙曲線。 time course 確定酶濃度5nM，反應(yīng)時(shí)間5-10min。 我的濃度梯度是0,50,100,250,500,1000,1500，，2000μM ATP，用排槍操作。 不知道什么原因前面幾個(gè)點(diǎn)的反應(yīng)速率就是上不去，得出的濃度-速率曲線總是近似一條斜線，Km值都上mM了~ 希望哪位高手能夠知道一下，或者是一起探討一下，小弟在此謝過了！！ 本來想發(fā)個(gè)求助帖的，金幣只有3.5，只好發(fā)個(gè)交流貼了 |
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