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做蛋白的抑真菌實(shí)驗(yàn)，用96孔板做IC50，一直做不出來
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最近在做蛋白的抑真菌實(shí)驗(yàn)，用96孔板做IC50，一直做不出來。有幾個(gè)問題想請教大家？ 1、做孢子懸浮液，我是將在平板上的真菌用接種針接到PDB培養(yǎng)基中，然后放在搖床中搖4-6天，再用8層紗布過濾，用水稀釋過濾后的孢子到所需的濃度。不知道這樣做孢子懸浮液對不對？之前實(shí)驗(yàn)室沒人做過。 2、用紙片擴(kuò)散法做抑菌圈，效果還可以，但是IC50就是做不出來，只有一次做出想要的結(jié)果，之后就沒重復(fù)出來，加藥后孔吸光值沒減反倒增了，不知道怎么回事？ 3、用紙片擴(kuò)散法做抑菌圈，在紙片的周圍時(shí)常會出現(xiàn)一圈白色的圈，網(wǎng)上說那是蛋白滲透圈，由于樣品濃度太高了。可是我那濃度還不夠呢，還沒達(dá)到文獻(xiàn)的要求呢。這個(gè)圈怎么能消除啊? 求高手指點(diǎn)�。。�！ |
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