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求教硅膠柱粗分中遇到的一些基礎(chǔ)問(wèn)題，新手 已有7人參與
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第一次過(guò)硅膠柱，很多不懂。樣品是乙酸乙酯部分 試了石油醚乙酸乙酯各個(gè)梯度展開(kāi)，點(diǎn)在薄層板上分的開(kāi)。100:4時(shí)第一個(gè)點(diǎn)rf=0.2左右，5：1和3:1點(diǎn)可以分得開(kāi) 1、乙酸乙酯樣品黑浸膏狀，110g,拌樣硅膠用量是多少，是不是要看溶液黏度？ 2、裝柱硅膠的用量大概多少，選擇多粗的柱子？ 3、石油醚乙酸乙酯的梯度怎么設(shè)計(jì)？多大的跨越才合適？ 4、每個(gè)梯度的洗脫體積一般多少？每個(gè)餾分接收體積一般多少？ |
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2樓2015-07-15 21:10:22
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| 過(guò)柱子是個(gè)經(jīng)驗(yàn)活，而且別人沒(méi)做也沒(méi)看到板子的情況光靠說(shuō)也拿不準(zhǔn)，有經(jīng)驗(yàn)的人跑個(gè)2-3次板基本就摸清了配比，這玩意沒(méi)點(diǎn)實(shí)際操作不積累經(jīng)驗(yàn)根本不行，第一次我也摸了十來(lái)遍才調(diào)出來(lái)，加硅膠按書(shū)上說(shuō)的比例有的時(shí)候不適用，拌樣加多少硅膠，裝柱裝多高硅膠，用多粗的柱子裝都得看經(jīng)驗(yàn)，有那經(jīng)驗(yàn)一看就知道加多少，有感覺(jué)了。110g的東西，拌上硅膠后，那柱子得不是一般的粗，至于多少溶劑，可以收集洗脫液之后點(diǎn)板看看 |
3樓2015-07-15 21:45:35
qydhn
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4樓2015-07-15 21:47:10
cqyc007
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5樓2015-07-18 09:05:54
公儀冬兒
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| 前兩個(gè)問(wèn)題自己看看書(shū)本就可以，拌樣硅膠的量以你的樣品散開(kāi)不粘結(jié)為準(zhǔn)。至于你的洗脫劑梯度和極性的話(huà)，第一個(gè)點(diǎn)100:4，分開(kāi)5:1，跨度有點(diǎn)大。我覺(jué)得你可以25:1,10:1等點(diǎn)板，摸清你要的點(diǎn)在每個(gè)極性段的位置，然后邊點(diǎn)板邊改變極性。新手的話(huà)可以保守的過(guò)，極性變化小一點(diǎn)，但是工作量是比較大。每個(gè)梯度的洗脫體積要看你的柱體積是多少，還要看你化合物的量。總之，柱子過(guò)多了就會(huì)有經(jīng)驗(yàn)的，加油。 |
6樓2015-09-30 18:26:19
HyunMario
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7樓2015-10-02 13:57:53
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| 建議 先上制備液相看下總體情況，再點(diǎn)板看下情況（20%，50%，80%），一般而言，一開(kāi)始一般都是用石油醚先除油，小極性是20%，30%，40%，50%，70%，80%，100%，大極性是20%，50%，60%，70%，80%，100%的過(guò)，減壓柱過(guò)挺快的，三天就過(guò)完了。拌樣的話(huà)，我一般都是選300-400目的，大概2倍的，一開(kāi)始按1.5倍算，再看下還有多少?zèng)]有拌好的，再來(lái)加硅膠。一般硅膠都是慢慢加，應(yīng)用盡可能少的硅膠拌樣 |
8樓2015-10-10 12:06:47
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