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[求助] 熒光染料/熒光探針熒光強(qiáng)度問(wèn)題已有3人參與

請(qǐng)問(wèn)各位大神，有誰(shuí)合成過(guò)某些熒光染料，在體外測(cè)試時(shí)候熒光很弱，但是在細(xì)胞內(nèi)測(cè)試時(shí)熒光特別強(qiáng)（共聚焦的激光開(kāi)的很弱，大概2%），我想知道這是什么原因！這個(gè)染料有個(gè)碳碳雙鍵的橋連，兩邊的基團(tuán)可以自由旋轉(zhuǎn)，他的溫敏和黏度性質(zhì)我都測(cè)試過(guò)，它隨著溫度的升高熒光減弱，隨著溶劑粘度的增加，熒光增強(qiáng)，但是只是增強(qiáng)了大約5倍。是不是這個(gè)染料和某些特殊的蛋白作用了，導(dǎo)致了碳碳雙鍵不能自由旋轉(zhuǎn)而熒光增強(qiáng)？還有您覺(jué)得這個(gè)熒光染料性能好不好？

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1樓 2015-07-16 10:15:04

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上善若水0224

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2樓2015-07-29 10:47:15

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2樓: Originally posted by 上善若水0224 at 2015-07-29 10:47:15
前輩，我不太清楚你說(shuō)的具體原因。另一事相詢，熒光探針染色后殺死細(xì)胞還能用激光共聚焦觀察到熒光么？因?yàn)樽龅氖侨~片組織，要觀察截面和亞顯微結(jié)構(gòu)的時(shí)候必須得固定后殺死細(xì)胞。非常感謝

不好意思啊，沒(méi)做過(guò)植物細(xì)胞。我們都是做的動(dòng)物細(xì)胞（正常的細(xì)胞和癌細(xì)胞），如果在細(xì)胞被殺死之前細(xì)胞將熒光染料或者熒光探針吞進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的話，共聚焦是能看到熒光的。

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3樓2015-07-29 20:54:14

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nickeyluan

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udarling: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流，歡迎再來(lái)！ 2015-08-11 11:21:46
ylaxfyy: 金幣+1, ★有幫助 2015-08-11 20:20:49

會(huì)不會(huì)是PH的影響？因?yàn)槟承┤玖显跇O端的PH下，熒光效果會(huì)變?nèi)?

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走馬觀花花已落，戎馬倥傯又年年！

4樓2015-08-05 10:44:56

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4樓: Originally posted by nickeyluan at 2015-08-05 10:44:56
會(huì)不會(huì)是PH的影響？因?yàn)槟承┤玖显跇O端的PH下，熒光效果會(huì)變?nèi)?

應(yīng)該不會(huì)是pH影響，這種熒光探針我們測(cè)試過(guò)pH效應(yīng)，有廣泛的pH適應(yīng)性！

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5樓2015-08-10 17:13:10

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happiness2632

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udarling: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流，歡迎再來(lái)！ 2015-08-11 11:22:00
ylaxfyy: 金幣+1, ★有幫助 2015-08-11 20:21:00

粘度，極性等都可能影響熒光強(qiáng)度。特別雙鍵的橋鏈在細(xì)胞里可能就變成剛性得了。另外，細(xì)胞內(nèi)的熒光強(qiáng)度和溶液里的不能類比。

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6樓2015-08-11 08:51:00

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6樓: Originally posted by happiness2632 at 2015-08-11 08:51:00
粘度，極性等都可能影響熒光強(qiáng)度。特別雙鍵的橋鏈在細(xì)胞里可能就變成剛性得了。另外，細(xì)胞內(nèi)的熒光強(qiáng)度和溶液里的不能類比。

這些我都測(cè)試了，在體外測(cè)試的，都沒(méi)有影響。我們做過(guò)其他類似的熒光探針，沒(méi)有像這個(gè)這么奇怪的。其他的探針如果黏度或者極性有影響的話，體內(nèi)和體外是類似的，要么熒光都強(qiáng)要么都弱。只有這個(gè)很奇特，體外熒光弱，體內(nèi)熒光特別強(qiáng)，我們猜測(cè)可能是和細(xì)胞內(nèi)的某些酶作用了，或者一些蛋白作用了，進(jìn)入到蛋白的某些通道導(dǎo)致了熒光增強(qiáng)。但是我們是做化學(xué)的，生物方面不懂，所以想了解一下！謝謝！

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7樓2015-08-11 20:27:10

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7樓: Originally posted by ylaxfyy at 2015-08-11 20:27:10
這些我都測(cè)試了，在體外測(cè)試的，都沒(méi)有影響。我們做過(guò)其他類似的熒光探針，沒(méi)有像這個(gè)這么奇怪的。其他的探針如果黏度或者極性有影響的話，體內(nèi)和體外是類似的，要么熒光都強(qiáng)要么都弱。只有這個(gè)很奇特，體外熒光弱 ...

如果化合物結(jié)構(gòu)中確定有某種受體，可以這么去猜測(cè)，如果不能只能簡(jiǎn)單探討。你可以試試不同溶劑，包括無(wú)機(jī)有機(jī)中光譜，如果有機(jī)溶劑中如DMC 中很強(qiáng)就不奇怪了。

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8樓2015-08-12 08:30:18

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ylaxfyy: 回帖置頂 2016-06-22 10:51:23
ylaxfyy: 取消置頂 2016-06-22 10:51:51

您好，我們現(xiàn)在也遇到這種問(wèn)題，麻煩問(wèn)一下，你找到其中的原因了嗎？非常感謝

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加油

9樓2016-06-17 15:18:19

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9樓: Originally posted by 自然天空 at 2016-06-17 15:18:19
您好，我們現(xiàn)在也遇到這種問(wèn)題，麻煩問(wèn)一下，你找到其中的原因了嗎？非常感謝

不好意思，這個(gè)最終也沒(méi)解決，我們最后房企利潤(rùn)

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10樓2016-06-18 18:14:28

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