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jiangwenting新蟲 (初入文壇)
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[交流]
跑電泳時(shí)，marker條帶還沒(méi)全跑開，目標(biāo)條帶還沒(méi)出現(xiàn)，樣品和marker就跑到電泳液離去了 已有2人參與
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RT，做WB也快大半年了，從來(lái)沒(méi)出現(xiàn)過(guò)這樣的情況啊，一般都是分離膠跑了一半marker最末端的綠色條帶就出現(xiàn)了，然后就是慢慢等各種條帶跑得更開，有利于后續(xù)分析。仔細(xì)回憶了下，貌似分離膠的濃度也沒(méi)弄錯(cuò)啊 給跪了！這到底是個(gè)什么情況啊。。。。會(huì)不會(huì)是濃縮膠小于2ml的緣故？但濃縮膠的作用不就是用來(lái)壓平基線的嗎。。。。  |
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2樓2015-07-20 09:37:38
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誰(shuí)說(shuō)濃縮膠是壓平基線的啊，那是水的活。。。 你做的是原核蛋白表達(dá)么？樣品沒(méi)有問(wèn)題么？濃縮膠過(guò)少有時(shí)會(huì)出現(xiàn)你這種情況，當(dāng)然不排除溫度等其他原因，你可以把電壓調(diào)低一點(diǎn)，跑時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)看看。 |
3樓2015-07-20 11:04:14
jiangwenting
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真真學(xué)習(xí)到了！謝謝前輩啊~出問(wèn)題的這次電泳時(shí)濃縮膠和分離膠分別定了60V和120V，您看是否合適？弱弱得再問(wèn)個(gè)問(wèn)題。。電壓能設(shè)到10啊20啊這么低的值嗎？ 4樓2015-07-20 14:15:22
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水不是用來(lái)壓平分離膠的嘛？做的是普通的細(xì)胞提取蛋白，樣品應(yīng)該是沒(méi)有問(wèn)題的，不才也已經(jīng)提了好多次啦~這次做的是百分之10的分離膠，以前做百分之8、12的都從來(lái)沒(méi)初現(xiàn)過(guò)這種狀況。 5樓2015-07-20 14:22:52
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6樓2015-07-20 14:30:21
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7樓2015-07-20 15:06:00
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