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[交流]
植物RNA提取
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實驗要做RNA提取，可是實驗室最近幾次幾個人提的效果都不太理想，這部分實驗比較重要，向各位高人請教下: 在野外條件下，采樣需要對樣品做些處理么？怎樣處理，特別是芽體？ 對多糖多酚植物怎么判定的？ 那個公司的試劑盒效率高些？ 小蟲剛剛接觸這個實驗，經驗不多，幫幫忙~~ [search]RNA[/search] |
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5樓2008-08-16 00:41:35
知秋
至尊木蟲 (著名寫手)
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xyklmu(金幣+5,VIP+0):感謝解答，很詳細到位，歡迎常來
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| invitrogen公司經典試劑盒trizol,效果很好，我們的樣品里多酚含量也很高，不過效果還可以，野外的當然取材后馬上放入液氮罐最好，提時注意低溫，有兩點最重要，一是磨樣時樣品分裝的管事先放入液氮浸一下，還有磨成的樣分裝和加trizol要快，不能等樣品變濕了，再就是加氯仿離心后轉上清時一定不要吸到中間白色東西，該舍就舍吧，再就是溶解rna時槍頭吹打要小心不要直接吹在沉淀上。其實RNA也沒那么嬌貴了，前面幾步用普通離心管就行，后面離開trizol保護后再轉到depc處理管，祝你好運。 |
2樓2008-08-10 17:03:07
snzydong
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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3樓2008-08-12 17:10:43
★ ★ ★
xyklmu(金幣+3,VIP+0):感謝答復，歡迎常來
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樣品當然是在液氮中保存最好。 多酚含量高的植物，在研磨或用手搓碎時，會很快變褐。果樹中多酚含量高的有蘋果、橄欖等。 多糖怎么判斷，我也搞不清楚。 對多酚含量高的植物，提取RNA時不一定用實際盒。下面這篇文章的方法就很好用。 這篇文章是免費的，你在google中搜索以下就可以了 RNA Extraction From Different Apple Tissues Rich in Polyphenols and Polysaccharides for cDNA Library Construction |
4樓2008-08-12 21:43:56
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