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著急呀，高效液相問(wèn)題，請(qǐng)高人指點(diǎn)一二呀 已有6人參與
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本人最近在用高效液相色譜測(cè)黃酮，色譜條件是：A甲醇 B 0.1%甲酸水溶液 流速：0.3ml/min 進(jìn)樣量：5微升 柱溫：30℃ 梯度條件為：0-20min：80-40%B 20-30min: 40-80B。無(wú)奈出現(xiàn)的峰不理想，也試過(guò)其他一些梯度，但是前邊的峰都分不開(kāi)，拜托大家指點(diǎn)指點(diǎn)。 IMG_20150726_211731.jpg |
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小毛孩24
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2樓2015-07-26 22:42:19
sytucom
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3樓2015-07-26 22:53:20
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4樓2015-07-30 08:15:24
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sytucom: 金幣+2, 回帖很精彩，希望繼續(xù)關(guān)注 2015-07-30 11:01:44
lvlingzhu: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-07-30 22:16:38
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lvlingzhu: 金幣+2, ★★★很有幫助 2015-07-30 22:16:38
| 我曾經(jīng)也做過(guò)黃酮的液相，個(gè)人建議，你把0~5min保持95%B，這樣做能夠使極性大的雜質(zhì)很快出峰，不影響后面黃酮的測(cè)定，還有就是提高甲酸的濃度，酸度越高越利于黃酮類物質(zhì)在反相柱里面保留，保留時(shí)間越長(zhǎng)，則越容易分開(kāi)，我以前用的是冰醋酸，不行你也可以用冰醋酸試試。還有就是哪段時(shí)間峰比較集中，你就把哪段時(shí)間的梯度變化快一些，我的經(jīng)驗(yàn)是梯度變化越快越容易使分不開(kāi)的成分分開(kāi)，還有就是你的流速是不是太慢了一點(diǎn)？另外，如果以上這些還不能解決你的問(wèn)題，建議你重新購(gòu)買一根新柱子試試，不要用國(guó)產(chǎn)的保護(hù)柱，柱子買安捷倫或者其他好牌子的。希望對(duì)你有所幫助，祝好！ |
6樓2015-07-30 10:38:09
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9樓2015-07-31 08:54:04
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