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t7929銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
RT-PCR出來(lái)的曲線(xiàn)特別雜亂，一點(diǎn)也不平滑是哪里出了問(wèn)題，急！在線(xiàn)等！ 已有1人參與
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a314919473
銀蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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最簡(jiǎn)單的方法就是電泳檢測(cè)下，看下擴(kuò)增產(chǎn)物是不是你想要的。 目測(cè)是非特異擴(kuò)增，原因很多： 1.擴(kuò)增子的大小是不是在80-250bp之間； 2.cDNA或者DNA是不是濃度過(guò)高，一般我們做都是拿原液直接稀釋8-10被左右進(jìn)行擴(kuò)增； 3.程序給出來(lái)，看下是不是程序錯(cuò)誤 4.儀器和試劑是不是配套，目測(cè)儀器是伯樂(lè)的，試劑方面ROX比例，因?yàn)槊總�(gè)儀器對(duì)應(yīng)的ROX含量不一樣，請(qǐng)確認(rèn) 5.你的求助也太簡(jiǎn)單了吧，具體點(diǎn)才能準(zhǔn)確回答，你用的什么，怎么做的能多清楚就多清楚，你這真不知道怎么回答你。。。 |
2樓2015-07-30 13:55:48
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