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tinychan新蟲 (初入文壇)
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[交流]
染色體步移法擴增側(cè)翼序列 已有4人參與
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| 最近在做染色體步移法擴增側(cè)翼序列,做了好多次,三輪PCR條帶都是彌散的,用了TAKARA的試劑盒,也沒有結(jié)果,技術(shù)說我的引物特異性不好,但是我設(shè)計的時候已經(jīng)是沒有錯配的。請問引物設(shè)計有什么注意事項呀?是要在保守區(qū)設(shè)計嗎?求大神支招! |
木蟲 (著名寫手)
新蟲 (初入文壇)
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
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這是我最近兩次做得,設(shè)計引物的時候按照嚴格的沒有錯配,沒有二級結(jié)構(gòu)。操作按照說明書做,但還是沒有結(jié)果,而且在第三輪PCR的時候突然出現(xiàn)一條較大而且很亮的條帶求大神賜教! PS.1-3為AP1的第一、第二、第三輪PCR產(chǎn)物,每隔一個MARKER 是一組。 20150726gw2 copy.gif |
新蟲 (初入文壇)
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