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請教關(guān)于G418篩選確定最佳濃度的問題!。。〈笊窨催^來,求助
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買了abcam的G418,問效價多少,回答沒有測哦~【真是XXXXXXXXXXXX】只能自己篩濃度了,本來實(shí)驗室都有常用濃度了的【再次xxxxxxxx】 想問下以下問題: 1.篩選濃度用的是正常完全沒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞還是轉(zhuǎn)染對照空質(zhì)粒的細(xì)胞。 2.本來實(shí)驗室的流程是14天抗性篩選,14天單克隆挑選。我想繼續(xù)用這套流程。那我濃度篩選的時候是應(yīng)該讓細(xì)胞多少天內(nèi)死光呢?是否應(yīng)該和我正常流程中正常細(xì)胞死亡的時間一致呢? 3.濃度篩選24孔板,是否需要平行幾份?每孔細(xì)胞量多少呢?種板多久之后開始換成含G418的培養(yǎng)基呢? |
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