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小寵醫(yī)生新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
桿狀病毒蛋白純化 已有1人參與
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我正在做桿狀病毒表達(dá)蛋白,目前發(fā)現(xiàn)蛋白表達(dá)了,在細(xì)胞裂解后的細(xì)胞沉淀中,可能是類(lèi)似于包涵體的東西,所以可能沒(méi)有活性,請(qǐng)問(wèn)怎么進(jìn)行變性、復(fù)性、純化呢?最后的蛋白準(zhǔn)備進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。 只有1.5個(gè)金幣。。。sorry |
新蟲(chóng) (小有名氣)
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新蟲(chóng) (小有名氣)
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我現(xiàn)在也在做桿狀病毒表達(dá)蛋白,可是做到提取質(zhì)粒轉(zhuǎn)染sf9,卻總是沒(méi)病變。 我用的堿裂解的方法提取質(zhì)粒,(是不是在出樣口有桿粒條帶和避免在最下邊的RNA帶),然后用無(wú)血清無(wú)抗的Grace培養(yǎng)液來(lái)進(jìn)項(xiàng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,(Grace是自己配制的,包括Grace 's insect cell culture medium,酵母浸出液,水解乳蛋白,碳酸氫鈉) 求指教 |
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