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1062bp的cDNA中間的一段總是克隆不出來 已有3人參與
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Atggccgcggagctggcgatgggcgccgagctgcccagcagcccgctggccatcgagtacgtcaacgacttcgacctgatgaagttcgaggtgaagaaggagcctcccgaggccgagcgcttctgccaccgcctgccgccaggctcgctgtcctcgacgccgctcagcacgccctgctcctccgtgccctcctcgcccagcttctgcgcgcccagcccgggcaccggcggcggcggcggcgcggggggcggcggcggctcgtctcaggccgggggcgcccccgggccgccgagcgggggccccggcgccgtcgggggcacctcggggaagccggcgctggaggatctgtactggatgagcggctaccagcatcacctcaaccccgaggcgctcaacctgacgcccgaggacgcggtggaggcgctcatcggcagcggccaccacggcgcgcaccacggcgcgcaccacccggcggccgccgcagcctacgaggctttccgcggcccgggcttcgcgggcggcggcggagcggacgacatgggcgccggccaccaccacggcgcgcaccacgccgcccaccatcaccacgccgcccaccaccaccaccaccaccaccaccaccatggcggcgcgggacacggcggtggcgcgggccaccacgtgcgcctggaggagcgcttctccgacgaccagctggtgtccatgtcggtgcgcgagctgaaccggcagctccgcggcttcagcaaggaggaggtcatccggctcaagcagaagcggcgcacgctcaagaaccgcggctacgcgcagtcctgccgcttcaagcgggtgcagcagcggcacattctggagagcgagaagtgccaactccagagccaggtggagcagctgaagctggaggtggggcgcctggccaaagagcgggacctgtacaaggagaaatacgagaagctggcgggccggggcggccccgggagcgcgggcggggccggtttcccgcgggagccttcgccgccgcaggccggtcccggcggggccaagggcacggccgacttcttcctgtag 引物F：GCGCggatccATGGCCGCGGAGCTGGCGATG R：GCGCactagtctacaggaagaagtcggccgtgc 這個是我想克隆的cDNA序列和引物，但cgggcaccggcggcggcggcggcgcggggggcggcggcggctcgtctcaggccgggggcgcccccgggccgccgagcgggggccccggcgccgtcgggggcacctcggggaagccggcgctggaggatctgtactggatgagcggctaccagcatcacctcaaccccgaggcgctcaacctgacgcccgaggacgcggtggaggcgctcatcggcagcggccaccacggcgcgcaccacggcgcgcaccacccgg這一部分總是克隆不出來，我用的KOD高保真酶，退貨溫度從55-80度都試過，這個cDNA是在質(zhì)粒載體上的。我也嘗試過質(zhì)粒線性化后pcr。我不知道是不是形成大的回文結(jié)構(gòu)，求各位大神支招，謝謝！ |
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3樓2015-08-02 17:10:58
2樓2015-08-02 13:13:05
我欲乘風歸去
木蟲 (正式寫手)
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4樓2015-08-02 18:07:10
xujian568
至尊木蟲 (著名寫手)
Count XU
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
5樓2015-08-02 22:56:34
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