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myx荷塘月色新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
跪求動(dòng)物細(xì)胞固定化操作步驟，具體點(diǎn)的 已有3人參與
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| 大家好！我想問(wèn)一下，動(dòng)物細(xì)胞用多聚甲醛固定，這個(gè)怎么固定？用PBS洗滌完畢后，直接加多聚甲醛固定，還是先用胰酶消化，再用多聚甲醛固定？如果是后者需要去除胰酶嗎？還有就是細(xì)胞固定這個(gè)濃度怎么控制？我沒(méi)有做過(guò)細(xì)胞固定，求各位大神指點(diǎn)，謝謝！ |
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2樓2015-08-05 13:57:28
3樓2015-08-05 17:15:09
myx荷塘月色
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非常感謝您的回答。我是第一次做細(xì)胞固定，我固定細(xì)胞就是用來(lái)檢測(cè)的，但是不是馬上就檢測(cè)，應(yīng)該回現(xiàn)在冰箱里放置一段時(shí)間。我今天做了一下細(xì)胞固定，是這樣做的，您看看有沒(méi)有什么問(wèn)題，謝謝！ 1.消化細(xì)胞； 2.終止消化； 3.調(diào)整細(xì)胞密度； 4.將細(xì)胞懸液離心； 5.PBS洗滌，離心，倒掉PBS； 6.加多聚甲醛重懸，室溫靜置； 7.離心，再用PBS洗滌； 8.再離心，加入透化劑； 9.再用PBS洗滌。 但是這樣做完之后離心管里只有一點(diǎn)點(diǎn)。而且我想知道固定后細(xì)胞是以何種狀態(tài)存在的。非常謝謝！ 您看看，哪里有問(wèn)題？ |
4樓2015-08-05 18:59:13
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5樓2015-08-05 19:01:37
6樓2015-08-06 08:49:32
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7樓2015-08-06 09:06:50
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9樓2015-08-06 12:26:42
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10樓2015-08-11 10:58:45
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