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米可兒come木蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于牛血清蛋白濃度測(cè)定的問題 已有2人參與
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我高分子材料專業(yè)的，在做一些抗蛋白吸附的材料，在具有微孔的聚偏氟乙烯膜表面鍍上親水的coating，可以起到抗蛋白吸附的作用。在性能測(cè)試的過程中，我配制了1mg/ml 的牛血清蛋白溶液（BSA溶液），并繪制了BSA的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用的是紫外分光光度法測(cè)的蛋白濃度，波長(zhǎng)設(shè)置的是280nm。然后我將我測(cè)材料放在1mg/ml 的BSA溶液中浸泡并輕微振蕩，保持24h，溫度為室溫 30℃，然后測(cè)溶液中蛋白的濃度，但結(jié)果發(fā)現(xiàn)測(cè)得的濃度均大于初始濃度，不是偶然，已經(jīng)做了很多組實(shí)驗(yàn)，目前我排除了多個(gè)可能導(dǎo)致吸光度增大的因素，如coating在浸泡過程中有溶出物增加吸光度，和基底材料中溶出物，以及親水鍍層吸水使溶液濃縮，但是這些經(jīng)實(shí)驗(yàn)和論證后均不成立，是不是問題出在蛋白本身上，我查資料BSA保存需冷藏，不知道30℃放置24h會(huì)不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性，變性會(huì)導(dǎo)致吸光度增加嗎 有對(duì)這方面了解的請(qǐng)幫我指點(diǎn)一下，這個(gè)問題已經(jīng)困擾了我很久，接下來的實(shí)驗(yàn)不知道該怎么辦了 |
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6樓2015-08-09 23:37:00
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7樓2015-08-09 23:37:36
米可兒come
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8樓2015-08-11 10:24:31
米可兒come
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9樓2015-08-11 10:26:58
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