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求PixFRET插件及使用方法 順便求助下confocal做FRET的技巧
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求PixFRET的插件，可以應(yīng)用于Image J上。順便求個(gè)使用攻略，第一次做，不太會(huì)用這個(gè)軟件及插件。 PS：1、最近用confocal作FRET樣品，用Leica TCS SP5，用的是LAS AF，非序列掃描，只是設(shè)置了多個(gè)PMT通道，總是有串色。比如某個(gè)樣品設(shè)置沒(méi)有第三通道的熒光，但是在掃描時(shí)依然有熒光出現(xiàn)。求問(wèn)是否一定要用LAS FRET SE這個(gè)方式不用LAS AF這個(gè)方式做樣品，還是說(shuō)用LAS AF，但是用序列掃描來(lái)避免串色？ 2、此外是否一定要像文獻(xiàn)中說(shuō)的先做單donor，再做單acceptor熒光，然后調(diào)節(jié)acceptor熒光最低（不太懂這一步，求指教），然后做FRET信號(hào)？ 3、做FRET時(shí)不同通道 PMT檢測(cè)范圍是否應(yīng)該更窄些？還是說(shuō)選擇軟件已有的熒光基團(tuán)就好？ 不知有沒(méi)有人懂這方面，非常急，在線(xiàn)等！ |
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chun.shui
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2019-05-26 21:38:21
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