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廝殺的山羊新蟲 (初入文壇)
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[求助]
RT-PCR陰性對(duì)照有目標(biāo)條帶是什么情況 已有2人參與
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各位大神好，我最近在做RT-PCR，RNA提取和逆轉(zhuǎn)錄應(yīng)該都沒(méi)有問(wèn)題，但是用逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA作模板跑出來(lái)的pcr電泳，陰性對(duì)照始終有條帶； 如圖，從左至右，第二個(gè)和第六個(gè)為陰性對(duì)照（用水替代模板，其它一樣），但是陰性對(duì)照也有帶，且位置和亮度與加模板p出來(lái)的產(chǎn)物基本一致，條帶大小大概100bp左右。這種情況已經(jīng)反復(fù)出現(xiàn)多次，引物以及pcr體系的各種試劑我都換新了但陰性對(duì)照還是有帶。 因?yàn)楫a(chǎn)物表達(dá)量很低，所以本人懷疑目標(biāo)基因沒(méi)有p出來(lái)，現(xiàn)在出現(xiàn)的條帶是引物部分?jǐn)U增出來(lái)的，請(qǐng)問(wèn)這樣理解對(duì)嗎？希望大家能指點(diǎn)一二，謝謝了！（這是我第一次在木蟲上發(fā)帖，所以沒(méi)辦法給大家太多金幣，希望能諒解  ）圖片1.png |
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新蟲 (初入文壇)
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4樓2016-01-12 22:44:26
angelyou
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2樓2016-01-11 22:47:50
angelyou
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3樓2016-01-11 22:48:52
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