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lynn111666銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
細(xì)胞復(fù)蘇 已有10人參與
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我的細(xì)胞復(fù)蘇后，狀態(tài)一直不好，感覺(jué)大小不一致，中間的核比較大，顏色偏深，而且貼壁較慢，鋪展很開(kāi)。 最近查了下復(fù)蘇的步驟，有說(shuō)復(fù)蘇后轉(zhuǎn)到離心管，最好迅速離心，減少DMSO對(duì)細(xì)胞的毒性；也有說(shuō)細(xì)胞從凍存管轉(zhuǎn)到15ml離心管之后，要逐滴加入培養(yǎng)基，時(shí)間不少于2min，使細(xì)胞慢慢適應(yīng)。 請(qǐng)教各位大牛，到底細(xì)胞復(fù)蘇后（快融之后）加一定量培養(yǎng)基時(shí)要快點(diǎn)，還是慢點(diǎn)？而且加多少培養(yǎng)基，再離心比較合適？ 謝謝  |
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3樓2015-08-20 12:40:30
昔我往兮
金蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lynn111666: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝 2015-08-23 13:04:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lynn111666: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝 2015-08-23 13:04:23
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細(xì)胞復(fù)蘇，復(fù)蘇效果和細(xì)胞種類(lèi)有關(guān)，其次，復(fù)蘇次日應(yīng)及時(shí)換新培養(yǎng)基，另外，復(fù)蘇速融后應(yīng)快速加入一般10倍體積的培養(yǎng)基，避免DMSO在較高溫度下對(duì)細(xì)胞的毒害，離心后換新培養(yǎng)基接種！ [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶(hù)端 ] |
2樓2015-08-20 11:22:03
fotony
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4樓2015-08-20 14:26:04
董博士
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5樓2015-08-20 16:34:55
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞一定要37度快速搖，大約3min內(nèi)可以融化，迅速置于培養(yǎng)基中，200G左右離心即可�；蛘呷诨笾苯与x心，然后直接加上培養(yǎng)基培養(yǎng)，24小時(shí)內(nèi)換液。一般第一種方法比較常見(jiàn)。其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇過(guò)程對(duì)細(xì)胞影響不大。你的細(xì)胞是什么細(xì)胞?是不是你的凍存有問(wèn)題？對(duì)于比較脆弱的細(xì)胞，加血清多點(diǎn)比較好。 |
6樓2015-08-20 18:22:38
阿喵110
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7樓2015-08-20 19:44:27
vita198861
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8樓2015-08-20 20:24:39
9樓2015-08-20 20:36:29
RodinYang
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10樓2015-08-20 20:38:07
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