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pqq226銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量問題
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| 新手一枚，剛做熒光定量幾次，絕對定量分析，相關(guān)系數(shù)R2偏低，擴(kuò)增效率很高，求人指點怎么回事 |
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pqq226
銅蟲 (初入文壇)
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- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
送紅花一朵 
3樓2015-08-29 11:00:56
claire8168
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 帖子: 32
- 在線: 14.7小時
- 蟲號: 695868
- 注冊: 2009-02-03
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最好把具體的結(jié)果貼上來，這樣比較好分析。 R2一般<0.97 這個標(biāo)準(zhǔn)曲線就是不可信了，如果是你稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品，那是不是稀釋的時候加樣不準(zhǔn)確，沒有充分混勻，如果是現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)品，有沒有充分融化混勻后使用。 擴(kuò)增效率一般在95%~105%之間都是可以的，約接近100%越好。你的擴(kuò)增效率具體有多高？ 擴(kuò)增效率一般反映出的是體系的問題，自配的體系還是試劑盒里配好的buffer？還有不知道你是用的染料法還是探針法，具體的引物和探針的設(shè)計是不是有問題？大概能想到這么多。希望能幫到你。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
2樓2015-08-28 16:07:38
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