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[求助]
已知一個(gè)天然產(chǎn)物，如何尋找它的作用靶點(diǎn) 已有2人參與
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| 已經(jīng)知道一個(gè)天然產(chǎn)物，有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性(nM水平)，如何尋找它的作用靶點(diǎn)？有什么策略或者好的方法，求各位有經(jīng)驗(yàn)的蟲友給些建議～～感謝��！ |
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gxzhou
木蟲 (正式寫手)
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- 注冊(cè): 2009-11-08
- 專業(yè): 中藥抗炎與免疫藥理
2樓2015-09-01 06:45:26
3樓2015-09-01 07:50:00
4樓2015-09-01 09:33:41
【答案】應(yīng)助回帖
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如果你要求這么詳細(xì)。那你就用pull down的方法，可以保證你找到幾乎所有可與化合物結(jié)合的靶點(diǎn)蛋白 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2015-09-01 12:03:09
6樓2015-09-01 14:19:59
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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GST pull-down實(shí)驗(yàn)是一個(gè)行之有效的驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù),近年來越來越受到廣大學(xué)者的青睞。 其基本原理是將靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巰基轉(zhuǎn)移酶）融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當(dāng)一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結(jié)合物后通過SDS-PAGE電泳分析,從而證實(shí)兩種蛋白間的相互作用或篩選相應(yīng)的目的蛋白,“誘餌蛋白”和“捕獲蛋白”均可通過細(xì)胞裂解物、純化的蛋白、表達(dá)系統(tǒng)以及體外轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得。此方法簡(jiǎn)單易行,操作方便。 GST pull-down技術(shù) GST：谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferase) |
7樓2015-09-01 19:42:51
8樓2015-09-01 19:45:09
9樓2015-09-02 09:29:06
10樓2015-09-02 09:58:24
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