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急等回答：要測轉(zhuǎn)錄組，RNA的 OD260/230特別低行不行啊 已有2人參與
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如圖，因為自己提取的RNA總是有殘留，直接委托測序公司一起提取。返回的結(jié)果如下 公司技術(shù)人員表示： 1. D260/230太低也沒關(guān)系，不用過多關(guān)心。 2.RIN值>6.5就行。 3.瓊脂糖完整度還可以。 4.最好直接建庫，建庫之后還可以檢測建庫質(zhì)量，如果質(zhì)量不好會從頭再提取建庫。 我表示很躊躇，本以為測序要求應(yīng)該比普通逆轉(zhuǎn)錄要求高吧，普通逆轉(zhuǎn)錄都沒法接受OD260/230那么低的。測序要經(jīng)過mRNA富集，所以有機(jī)試劑殘留沒關(guān)系?有點(diǎn)擔(dān)心殘留會影響建庫的質(zhì)量，公司對建庫的質(zhì)量檢測要求低于我的預(yù)期或者建庫檢測沒問題而我關(guān)注的基因因此受到影響怎么辦。。。。 求指教�。。。。。。。� 附： 他們公司的RNA質(zhì)量要求： 樣品的量：真核：總量≧6ug；原核：總量≧20ug。 樣品濃度：真核：濃度≧100ng/ul； 樣品純度：OD260/280≧1.8；28S/18S≧1。 RNA完整性：植物、真菌 RIN值≧6.5；動物 RIN值≧7.0；原核 RIN值≧6.0。 別個公司的： OD 260/280介于1.8-2.2之間，OD260/230≧2.0 電泳檢測28S:18S至少大于1.5； RIN值≧8.0；并確保RNA無降解，無污染 |
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