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western blot 求助 已有1人參與
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求助各位大蝦, 我前后兩次做WB電泳、轉(zhuǎn)膜條件不變的情況下,只是根據(jù)第一次結果增加了一組的上樣量,為什么第二次WB的內(nèi)參三組樣完全不齊,前兩組條帶特別不清楚。另外目的條帶兩次的都沒有,以前做出來都有的。轉(zhuǎn)膜條件是:濕轉(zhuǎn),恒流250mA,17KD大小蛋白PVDF膜0.22um, 時間為1小時,內(nèi)參為a-tubulin,目的條帶為90kD,PVDF膜0.45um,時間2小時。 有什么地方錯的,或者遺漏的,求指出。 |
金蟲 (初入文壇)
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