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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 點突變遇到的難題？
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一地雞毛顧鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
點突變遇到的難題？ 已有1人參與
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用試劑盒做點突變。 引物設計如下： Forward primer 685: 5- TGT ATC TAT GCC GTA AAG GCG AAC ACC GCT GTA TGG CAC TGG -3 Rervese primer 685: 3- CGT CGG CTA TAC GAA ATG ATG ACA TAG ATA CGG CAT TTC CGC -5 PCR體系：ddhH20:18.5UL buffer:25ul dNTP 1UL 模板：0.5ul 引物R :2ul 引物F:2ul DNA聚合酶1ul PCR擴增條件：預變性 98度 30s 變性 95度 15s 退火 67度 15s 延伸 72度 45s 30個循環(huán) 徹底延伸 72度 5Min 結果，沒有P出來，有彌散帶，沒有加模板的空白對照沒有彌散帶，模板中大部分為非超螺旋，因為有三條帶，最上面的最濃，其余兩個比較淺 。求大家?guī)臀曳治鲆幌略? |
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3樓2016-07-13 22:34:34
一地雞毛顧
鐵蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 62.1
- 散金: 20
- 帖子: 25
- 在線: 31.2小時
- 蟲號: 3031911
- 注冊: 2014-03-09
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學
2樓2015-09-02 10:39:26
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