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1270853789鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
請求大神幫忙分析目的蛋白的表達含量！ 已有1人參與
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這是我做的電泳圖，目的蛋白是從上往下看的第一條帶，第十個泳道是對照組，我自己下載了蛋白質(zhì)含量分析的軟件，可是不會用啊，請求幫忙 分析.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1270853789: 金幣+10, ★★★很有幫助 2015-09-06 15:16:24
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1270853789: 金幣+10, ★★★很有幫助 2015-09-06 15:16:24
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1.電泳跑的有點差哦，可以少上點樣跑電泳，用你現(xiàn)在上樣的3分之一，差不多了。你的目的蛋白時那一條。直接看是不出來時多少的。 2.先用BCA測總蛋白量，在用gel analyzer算電泳條帶中目的蛋白體積占總體積的比例，在計算的表達量。雖然得到一個數(shù)據(jù)，但基本沒任何意義，是發(fā)文章忽悠人用。 3，建議你用多少mg目標(biāo)蛋白/克濕菌體或ml培養(yǎng)液，方式表達。 只以目標(biāo)蛋白為主體，不要管其它蛋白。 4.若扔需要用gel analyzer軟件分析體積比，自己下個軟件，先找個圖片練練手，應(yīng)該半個小時你就知道怎么用了，很簡單的。然后在測你的總蛋白，然后就計算，很簡單，雖然這種方法是自娛自樂，沒有什么意義，若堅持這樣做就可以。 5.以單位菌體或培養(yǎng)液中目的蛋白的表達質(zhì)量為描述方式，難度比較大，直接能在混合液中對你的目標(biāo)蛋白進行定量。若不行，還需將目的蛋白先和其它蛋白分離。 祝順利。 |
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12708537892樓2015-09-05 21:30:17
1270853789
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2015-09-06 15:07:51
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