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蜂鳥(niǎo)404鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
這個(gè)燒腦的引物我設(shè)計(jì)的對(duì)嗎，請(qǐng)大神指正
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| 我手上有一個(gè)質(zhì)粒由于拷貝數(shù)比較低所以用酶切連接方法一直連接不上目的片段，現(xiàn)在我想通過(guò)PCR的方法直接將我的目的片段融合到質(zhì)粒上，不知道有沒(méi)有人這樣做過(guò)，我從質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)附近設(shè)計(jì)反向引物，利用反向pcr擴(kuò)增出線(xiàn)性質(zhì)粒片段，然后利用目的片段引物與反向引物的重疊區(qū)域?qū)⒛康钠魏唾|(zhì)粒融合并環(huán)化，我的質(zhì)粒大小5k左右，目的片段1.5k,我取目的片段上首20bp和尾20bp作為重疊區(qū)域，我設(shè)計(jì)的引物如附件中所示，由于這種引物設(shè)計(jì)有點(diǎn)復(fù)雜我怕有錯(cuò)，請(qǐng)大家看看有沒(méi)有問(wèn)題，特殊標(biāo)記的我已經(jīng)解釋代表什么了，希望大家批評(píng)指正 |
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2015-09-07 15:56:47, 32.36 K
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