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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 重組之后單酶切鑒定偏小
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重組之后單酶切鑒定偏小 已有5人參與
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http://![\"重組之后單酶切鑒定偏小\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/0911/w131h2462014_1441939855_851.jpg#opennewwindow\") 如圖所示：1、2為原始質粒以及其單酶切、3、4為克隆之后的質粒以及單酶切。從途中看應該是沒有連上。但是在克隆板上：載體雙酶切連接過夜轉化后沒有長出克隆子，載體加目的基因連接的板上大概出現(xiàn)75個克隆子這樣。 載體大小：10kb ，目的基因700bp，使用BamHⅠ和HpaⅠ進行雙酶切。連接摩爾比為載體：目的基因=1：3，目的基因為pcr產物，在BamHⅠ酶切位點前有兩個堿基，在HpaⅠ酶切位點后有100bp片段。 連接了好幾次都得到同樣的結果，請問這是怎么回事啊，做了兩個月了，煩，求大神指點迷津 |
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2樓2015-09-11 11:01:46
憐兒新
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6樓2015-09-15 21:41:09
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7樓2015-09-16 08:57:24
8樓2015-09-16 10:49:22
yeyatouyhj
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9樓2015-09-16 12:30:58
10樓2015-09-17 10:50:22
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