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張小姐123木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于做蛋白標(biāo)曲中的濃度計(jì)算問題。 已有2人參與
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| 用BSA做的蛋白標(biāo)曲R2有兩個(gè)九。將已知濃度為0.5mg/mll的β酪蛋白溶液在酶標(biāo)板上測(cè)定吸光值，代入標(biāo)曲計(jì)算得到的β酪蛋白濃度為0.25mg/ml。這個(gè)大概兩倍的濃度差異到底是如何造成的，請(qǐng)大神指教啊。 |
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9樓2015-09-16 16:28:10
evangelina
無蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
張小姐123: 金幣+50, ★★★很有幫助 2015-09-11 20:13:32
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
張小姐123: 金幣+50, ★★★很有幫助 2015-09-11 20:13:32
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首先要確定目標(biāo)蛋白的濃度在標(biāo)曲的線性區(qū)間里面，否則就應(yīng)該先適當(dāng)稀釋再測(cè)通光量 如果上面做對(duì)的話，有沒有可能是蛋白已經(jīng)降解了呢 也有可能是那個(gè)蛋白跟BSA在氨基酸構(gòu)成上相差很遠(yuǎn)，所以從BSA來的標(biāo)曲就不夠準(zhǔn)確 可以考慮用其他方法 例如 lowry 或者 280 |
2樓2015-09-11 19:34:49
張小姐123
木蟲 (小有名氣)
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- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2015-09-11 20:13:23
4樓2015-09-11 23:47:39
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