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各位，革蘭氏陽性菌質(zhì)粒老是提取不出來，但PCR又做的很成功的，這是怎么回事 已有6人參與
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我用的是EZMA質(zhì)粒小提試劑盒，各位看看有沒有什么要注意的地方 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-09-13 23:01:03
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如果確定菌液中有質(zhì)粒。質(zhì)粒提取，溶液II比較重要。裂解的作用。加入溶液二之后有沒變澄清。沒變的話氫氧化鈉失效。補加一些。如果澄清的話。應(yīng)該是上注液的問題。上柱丟失，應(yīng)該是試劑盒的問題�？梢哉覐S家。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2015-09-11 23:37:34
baichi121234
禁蟲 (職業(yè)作家)
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2樓2015-09-11 23:23:52
renzhiq
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-09-13 23:01:19
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你用的什么菌？革陽大多數(shù)中的質(zhì)�？截悢�(shù)很低，不可從中直接提取。更不能完全按照質(zhì)粒小提的方法提取，需要注意兩點。一是破壁，二是防止核酸酶降解。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-09-12 08:23:50
jackyoung
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這里不針對試劑盒提任何意見，前提是你選的適用這個菌株而且沒有問題就好。 拷貝數(shù)是個大問題，而拷貝數(shù)與所用質(zhì)粒種類和菌株特性有關(guān)，所謂的提不提的出來其實是量的問題，太少的話很難直接檢測倒是事實。 菌液PCR假陽性率很高，一則嚴(yán)格的正負(fù)對照，二則得到條帶不代表每個都能提取得到（指多克�。�。 祝好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2015-09-12 08:55:17
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