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love犬夜叉木蟲 (小有名氣)
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[求助]
轉(zhuǎn)化后小量可以搖起來,轉(zhuǎn)接大量搖不起來 已有1人參與
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| 做質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化,到XL1-blue菌,涂板后12小時很小,所以培養(yǎng)到第二天下午,滿板子小菌落,牙簽挑單菌落在氨芐和四環(huán)素(涂布的板子也是這兩種抗生素)的培養(yǎng)基(1.5mlEP)管中培養(yǎng),幾個小時后無明顯渾濁,所以又過夜,第二天取菌液做PT-PCR,呈陽性,第三天(菌液放-20保存)取200微升、400微升接種到20ML 雙抗LB培養(yǎng)基(開始加的200微升,幾個小時后沒長,就又接了幾管400微升的一起過夜培養(yǎng)),第四天早上看的時候,有的很清亮,有的略微渾濁,只有一個比較渾濁,又都做了一次RT-PCR,結(jié)果ct值都一樣,拿長得最渾濁的那個轉(zhuǎn)接到20ml雙抗培養(yǎng)基又不長了,提質(zhì)粒也沒有條帶,不知道是沒有還是太微弱檢測不出來。求大神指點 |

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