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dongniaoxin鐵桿木蟲 (正式寫手)
響當當?shù)哪绢^
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[求助]
QC微生物實驗室的菌種保藏方法
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| 微生物實驗室常用的菌種有大腸埃希菌,金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌,枯草芽孢桿菌,生孢梭菌,白色念珠球菌,黑曲霉和傷寒桿菌。現(xiàn)在為節(jié)約成本想要更改保存方法,以前是斜面保藏,保藏時間太短,現(xiàn)在想做甘油菌凍存,大腸埃希菌,金黃色葡萄球菌還有枯草芽孢桿菌操作起來應該不是難事,可是其他五種該怎么操作呢?請專業(yè)人士作答,最好能給出實驗方案和保藏時間鑒定方法。感激不盡 |

| 斜面保藏只能在4 oC下,實在保藏的時間太短,甘油凍存雖然時間會長一些,但效果也不好。就我所知,目前最好的保存方法是液氮保藏,或者是用10%-20%的DMSO(二甲基亞砜)保藏。尤其是用DMSO方法保藏菌種,方法簡單,成本低,菌種存活的時間長,活性高。你可以用小的1ml的存菌瓶(小玻璃瓶有蓋,我不知道國內(nèi)是否有),加入1-200微升的DMSO,滅菌后備用,然后將你培養(yǎng)的液體菌液之間加入小瓶,不要裝的太滿,以免冷凍時瓶子破裂。在-70度下保藏4-5年不成問題,在-20度,1年左右應該沒問題。你可以在每個月的1號用牙簽從小瓶中取出少量,接種到適當?shù)呐囵B(yǎng)基上,在適當?shù)臏囟认屡囵B(yǎng),觀察菌種是否可以生長,以確定其活性。這樣你就可以知道每種不同的菌在用DMSO保藏時可保藏的時間了,當然你同時最好用甘油保藏的做對照,比較兩者的差異。經(jīng)過一年后,你的記錄甚至就可以寫一篇小的論文了,而且很多人會從中受益。祝你好運! |
新蟲 (小有名氣)
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2樓: Originally posted by guoshk at 2015-09-17 22:40:12 斜面保藏只能在4 oC下,實在保藏的時間太短,甘油凍存雖然時間會長一些,但效果也不好。就我所知,目前最好的保存方法是液氮保藏,或者是用10%-20%的DMSO(二甲基亞砜)保藏。尤其是用DMSO方法保藏菌種,方法簡單, ... 所以大家有實驗嗎?我個人覺得不是特別重要的菌種,甘油保藏足夠了,如果真的很重要,建議液氮保存 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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