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WANJUN0209新蟲 (初入文壇)
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[求助]
多巴染色法觀察黑色素實驗的相關(guān)問題
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由于現(xiàn)在做的實驗用到多巴染色后切片染色觀察組織中的黑色素,現(xiàn)已初步弄清了實驗方法,但還是有些細(xì)節(jié)不清楚。以下是我在文獻上看到的方法,步驟如下: 在4%多聚甲醛中進行固定,組織浸于孵育液中1 h,更換孵育液繼續(xù)孵育24 h,流水沖2~6 h;Bouin’s液重新固定24 h;先后用70%、80%、90%、95% 乙醇及無水乙醇進行脫水,二甲苯透明,石蠟包埋; 切片厚6 μm; 二甲苯脫蠟,再用無水乙醇及95% 、90% 、80% 、70% 乙醇脫水,0.1% 核固紅染浸泡10 min,流水沖15 min; 先后用70%、80%、90% 、95% 乙醇及無水乙醇進行脫水、二甲苯透明,中性樹膠封片。 其中的孵育液和Bouin‘s液已經(jīng)在網(wǎng)上查到了配制方法,現(xiàn)在就是0.1%核固紅染液不知怎么配,希望有經(jīng)驗的可以回下貼。關(guān)于實驗中有要注意的地方也請大家不吝嗇指出啦!謝謝啦! |
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