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[求助]
急急急�。�！關(guān)于pcr引物設(shè)計(jì) 已有5人參與
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我要擴(kuò)增下面的序列 atgaaat ctaaactttt gattacttca ttattagtag gcgctattat 281281 aattggagga tgtagtgcgg gtaattcgga atctaataat aattcaaata tggaccattc 281341 taatatgtct ggtatggacc attccaatat gagtgatgaa gaaatgaaaa acatggaggg 281401 tatggataat aaagatagta gcatggaaaa tggtcatgcg agtcataaca atccattagc 281461 attaaataat tcaaatgggg aaaatgagct tgcgctccca cctattattg aacctaaaaa 281521 tggaattgtt gatattactg ctcaacaagg aacaacagaa atctttaagg gaactaaaac 281581 agagacatat ggatataatg gttccttttt agggccaatc attcgtatta ataaagatca 281641 aacggtaacg tttagaacta aaaatgattt atctgaacca acaacatttc actggcatgg 281701 attagaaatc cctggaaatg gtgatggcgg cccacatcaa gtcctagagc caggtgtaac 281761 agaagatgta aattttacag ttaatcaggg agcatctacg ctgtggttcc atccacatcc 281821 agaaggtgct acagcagagc aagtatataa aggtttagct ggtttaattt atatagatga 281881 tgaaaactca caagaaatca atgtaccaaa tgaatatggt gtgaatgatt ttccattagt 281941 attccaagat agacaattta ctgaagaaaa gcaattaaat tatcaagcag tccttaatga 282001 agatggtaca attggagata ctttattaat taatggtacg ttgaatccta aacttacagt 282061 tggtaaagaa aaagtaagac ttcgtttatt aaacggttct aatgctcgta attatacttt 282121 taaattgaat accggagata cattccaaca aattgctact gatggtggtt tcttaaatca 282181 accaactgat atgaaagaaa ttaccttaac accaggtgag cgagcagagg taatagtgga 282241 cttttcaaaa atggatgaca agactgatat agcattaata aatgatgaag gtactaccct 282301 tttaccattt aaaattgaac aaaagactac aagtacaagt aaaatttcag aaaaattaaa 282361 tgattttagt gttactgaag aagagaaaaa tttaccagtt tctaagaagc ttgaactatt 282421 tggtatgggg acaatggttt ctataaatgg aaaccagttt gatatgaatc gcattgattt 282481 cactcaaaag cagggtgaga ctgaaatttg ggaaatttat aataaacctg atatgatggg 282541 tggtatgaca catcctttcc acatacatgg cactcaattt aaaatcgtgt cgattgatgg 282601 tcaagaacct cctttaaatt taaaagggtg gaaggatact gtctcaattg aagctggtca 282661 aacagttaaa ttagcagtga agtttaataa taagggcata tacatgttcc actgccatgt 282721 ccttgaacat gaagaaaatg gtatgatggg gcaagttgaa gtaaattaa 設(shè)計(jì)的引物 上游 5’ atgaaatctaaacttttg 3’ 下游 5’ ttaatttacttcaacaac 3’ 感覺連續(xù)相同的堿基太多，pcr結(jié)果只有二聚體。哪位大神能幫我設(shè)計(jì)一下，急求！ |
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4樓2015-09-18 15:19:51
冰悅淚tear
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 112.4
- 帖子: 51
- 在線: 10.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 2997128
- 注冊(cè): 2014-02-26
- 專業(yè): 中藥學(xué)
2樓2015-09-18 11:21:44
★ ★ ★
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-18 22:29:53
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-18 22:29:53
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Forward primer GTGCCTATGTAAAGAATAAAAGGAG Reverse primer TTAATATGAACCACGACCAA Product length 1672 NCBI數(shù)據(jù)庫上的比對(duì)結(jié)果如下：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tool ... p;CheckStatus=Check |
3樓2015-09-18 13:28:36
冰悅淚tear
新蟲 (小有名氣)
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5樓2015-09-18 15:34:06
6樓2015-09-18 15:34:15
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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我去，你這gc含量估計(jì)不到20%不行加gc含量多的酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基吧。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2015-09-18 16:18:23
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-18 22:30:18
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-18 22:30:18
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另外擴(kuò)增全長(zhǎng)要求特異性高，需要引物長(zhǎng)度26+你這引物太短了，設(shè)引物前先查查資料…做科研當(dāng)伸手黨可不好，再試試吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2015-09-18 16:20:06
9樓2015-09-18 18:17:48
10樓2015-09-18 18:22:29
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