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馨-馨銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
測定胺類標準曲線問題
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原理： 利用TNBS和胺類物質(zhì)形成絡(luò)合物，溶于甲苯。 方法：取200ul 胺類標準液，標準液濃度分別為0ug/ml, 50ug/ml, 100ug/ml, 150ug/ml, 200ug/ml, 250ug/ml. 200ul 1M K2CO3 ;(提供堿性環(huán)境） 200ul TNBS , 40℃，5min; 用800ul 甲苯萃取 ，渦旋20s,2000rpm ,5min. 取200ul 上層液體，340nm測吸光值。 問題：測了很多次，出來的值，線性很差，R值中只能出現(xiàn)一個9 ，請各位大神指教。 是反應(yīng)體系太小了嗎，還是什么原因？ 可不可以提高胺類物質(zhì)的濃度，反應(yīng)體系不變，甲苯萃取后的液體，通過合適的梯度稀釋，在用340nm測吸光值，該值能夠用于標準曲線的繪制嗎？ 歡迎各位大神多多指導(dǎo)，本人菜鳥一名呀~！~！ |
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