 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3693 | 回復(fù): 1 | ||
moroseman新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
提RNA中的DNA污染問題以及RT-PCR 已有1人參與
|
|
本人剛接觸分子生物，導(dǎo)師讓我做一個(gè)，目的基因的表達(dá)量的確定。 我第一次提了RNA，然后做了RT-PCR，出現(xiàn)了很多問題，希望各位同學(xué)能給予我一些幫助。 1. 我是用simgen的植物總RNA提取試劑盒，提了RNA，結(jié)果如圖1.RNA有降解，而且濃度嚴(yán)重不足，而我加的樣品量也是足夠的。手套，搶頭，移液槍都是進(jìn)口。我?guī)熃闾岬腞NA都是比較亮的，而我的嚴(yán)重不足。想詢問下各位大神，如何提高RNA濃度？RNA濃度是100ng per ul 77ng per ul 2. 接下來又做了，RT-PCR，如圖2，1.RNA 2.空 3.cDNA 4.DNA消化的RNA，5.RNA 用了mix做PCR，6.cDNA 用了MIX做PCR，7.DNA消化過的RNA。后三個(gè)都是用來MIX：是一種用于PCR只需加模板引物就行的混合液。跑膠跑了，3ul。問題來了，RNA中混了genemicDNA。 3. 為了檢測 RNA中混有的genemicDNA量的大小。于是我又做了一次PCR 35cycle。如圖3 control 1.RNA模板PCR(無反轉(zhuǎn)錄) 2.RNA 模板 mix（無反轉(zhuǎn)錄） 3.cDNA模板 4. cDNA mix RNA加了50ng cDNA 1ul由于RNA 80ng 20ul體系做RT，姑且算作cDNA為40ng per ul，結(jié)果也是不理想，還能繼續(xù)往下做嗎？ Note：實(shí)驗(yàn)室的DNA消化試劑盒出現(xiàn)了問題。 如何減少RNA中DNA的污染，以及提高RNA的濃度 1.jpg 2.jpg 3.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有69人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
uulovelyuu
至尊木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 35 (小學(xué)生)
- 金幣: 15171.7
- 紅花: 34
- 帖子: 1346
- 在線: 309.7小時(shí)
- 蟲號: 2444856
- 注冊: 2013-05-02
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2015-10-21 10:17:25
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 moroseman 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +3 | 學(xué)而思兮知 2026-04-01 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 295分求調(diào)劑 +15 | W55j 2026-03-30 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 273求調(diào)劑 +19 | 李芷新1 2026-03-31 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 食品學(xué)碩362求調(diào)劑 +3 | xuanxianxian 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703求調(diào)劑 +4 | zizimo 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +10 | Eujd1 2026-03-31 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)296求調(diào)劑 +10 | 湯圓包 2026-03-29 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 358求調(diào)劑 +3 | 王向陽花 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)專業(yè)279調(diào)劑 +10 | 哈哈哈^_^ 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +10 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +8 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 293分求調(diào)劑，外語為俄語 +5 | 加一一九 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中師范化學(xué)332分求調(diào)劑 +3 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +5 | Sanmu-124 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +14 | A child 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 汲亦昊 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 數(shù)一英一271專碩（085401）求調(diào)劑，可跨 +7 | 前行必有光 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求佛 +7 | 迷人的哈哈 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|