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icid銀蟲 (初入文壇)
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western blot 檢測(cè)磷酸化蛋白之后是否需要strip去除抗體再檢測(cè)總蛋白? 已有4人參與
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| 許多文獻(xiàn)會(huì)給出磷酸化蛋白的條帶以及相應(yīng)的總蛋白(磷酸化和未磷酸化蛋白)的條帶,那么在檢測(cè)完磷酸化蛋白之后是否一定要strip去除原來(lái)的一抗二抗之后才能檢測(cè)相應(yīng)的總蛋白?如果沒(méi)有strip,那么檢測(cè)到的總蛋白結(jié)果是否可靠?如果strip了,那么是否需要驗(yàn)證原來(lái)的一抗和二抗已經(jīng)去除干凈(即再次封閉后孵育二抗,然后再檢測(cè)),而不只是加顯影液檢測(cè)二抗?另外,有些抗體沒(méi)有標(biāo)明可以同時(shí)檢測(cè)磷酸化和未磷酸化的蛋白,那么這種抗體是否不合適?有人注意過(guò)這個(gè)問(wèn)題嗎? |
無(wú)蟲 (小有名氣)
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