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99蝸牛99新蟲 (小有名氣)
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[交流]
提取酵母基因組時(shí)所需的1:1的苯酚/氯仿試劑是怎么配置的，求教。。。。
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提取酵母基因組時(shí)所需的1:1的苯酚/氯仿試劑是怎么配置的，求教。。。。 （1） 取1mL30℃，200rpm過夜活化的菌液，10000rpm離心1min，棄上清； （2） 0.5mL無菌水重懸菌體，離心棄上清； （3） 加入0.2mL破菌緩沖液，與菌體等體積的玻璃珠和0.2mL酚/氯仿，渦旋振蕩5min； （4） 加入0.2mLTE Buffer，快速振蕩，高速離心5min； （5） 吸取上清轉(zhuǎn)移至新的離心管，加入0.2mL酚/氯仿，重復(fù)抽提至無中間沉淀相； （6） 加入1mL無水乙醇，顛倒混勻； （7） 12000rpm離心5min，棄上清，沉淀用50μL TE緩沖液或水溶解； |
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