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busen鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助！如何把線性雙鏈DNA病毒基因組（36kb)和載體元件直接連起來 已有2人參與
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因?yàn)橐獦?gòu)建腺病毒載體，需要把腺病毒的全基因組和載體元件 （復(fù)制原點(diǎn)、抗性基因等）直接連起來已經(jīng)嘗試了通過同源重組 的方法：構(gòu)建包含載體元件以及重組同源臂的重組質(zhì)粒（左右同源臂分別為1500bp,2500bp，圖譜如下），共電轉(zhuǎn)BJ5183感受態(tài)，沒有篩到陽性克隆嘗試采用TAKARA INFUSION 試劑盒，想通過一步重組法直接將載體元件和腺病毒末端連接起來，也篩不到陽性克隆以上兩種方法都重復(fù)了好些遍，不斷改變載體的基因組的濃度和摩爾比，都無法得到目的克隆菌株，不知道出了什么問題，求大神解答 腺病毒基因組圖譜.JPG 重組質(zhì)粒圖譜.JPG |
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fengxueren
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4樓2021-02-18 00:34:49
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junjieshao
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3樓2020-11-12 04:45:25
fengxueren
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5樓2021-02-18 00:35:13
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