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winnerwfy新蟲 (初入文壇)
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[求助]
生化實(shí)驗(yàn):氨基酸紙層析 已有1人參與
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| 氨基酸紙層析的Rf值小于標(biāo)準(zhǔn)氨基酸Rf值是什么原因 |
鐵桿木蟲 (小有名氣)
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Rf值決定于很多因素,其中最主要的是所分離物質(zhì)的分配系數(shù),物質(zhì)的分配系數(shù)是由以下因素決定的: (1)物質(zhì)極性的大小:水的極性很強(qiáng),一般極性強(qiáng)的物質(zhì)就容易進(jìn)入水相,非極性的物質(zhì)易進(jìn)入有機(jī)溶劑中。例如:側(cè)鏈含-OH和-NH2、-COOH較多的氨基酸易分配在水相中,Rf值較小。而含非極性基(如-CH3)較多的物質(zhì)其分子的極性降低,Rf值增大。 (2)濾紙的質(zhì)地以及為水分飽和的程度:濾紙的質(zhì)地必須均一、純凈、厚薄適當(dāng),具有一定的機(jī)械強(qiáng)度,層析前應(yīng)為水和有機(jī)溶劑的蒸汽所飽和。若濾紙的質(zhì)地一般則會(huì)影響氨基酸的移動(dòng),導(dǎo)致Rf偏小。 (3)溶劑的純度、PH值和含水量:PH值和含水量改變可使氨基酸和層析溶劑極性改變,Rf值也隨之改變。 (4)層析的溫度和時(shí)間:溫度改變使溶劑中有機(jī)相含水量改變,Rf值也改變。當(dāng)所有條件相同時(shí),層析時(shí)間短,則Rf值小。 因此,在層析過程中,對(duì)以上影響Rf值的因素必須嚴(yán)格控制,另外人為誤差也可能影響Rf值。 |

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