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三爺111金蟲 (小有名氣)
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[求助]
跪求Raw細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，已然處于崩潰的邊緣，求大神指點(diǎn)！ 已有3人參與
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| 有沒有人做過Raw細(xì)胞轉(zhuǎn)染啊？近兩三個月了，一直卡在Raw細(xì)胞過表達(dá)實(shí)驗(yàn)上，沒有一點(diǎn)進(jìn)展。簡直要崩潰了。嘗試過換轉(zhuǎn)染試劑，也各種摸索濃度條件，依然轉(zhuǎn)染效率低于10%。最近剛換了羅氏的轉(zhuǎn)染試劑X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent，昨天試了一次，效果依然不理想。不知道是怎么回事。我轉(zhuǎn)染之前細(xì)胞密度在50%左右，說明書上寫的是轉(zhuǎn)染前細(xì)胞密度在70%-90%，想問下細(xì)胞密度對轉(zhuǎn)染效率影響很大嗎？有沒有用過這款轉(zhuǎn)染試劑在RAW細(xì)胞上轉(zhuǎn)的同志啊？還請指點(diǎn)一二啊。或者有用其它方法轉(zhuǎn)染在Raw細(xì)胞上轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的同學(xué)，也請不吝賜教。 |
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