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sagaphilip新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
不明蛋白質(zhì)溶液的蛋白含量怎么測(cè) 已有1人參與
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| 對(duì)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)不太了解�，F(xiàn)在有一種復(fù)雜蛋白混合物凍干粉，離心后收集上清液中蛋白，想測(cè)一下上清液中的蛋白含量。這種情況用什么方法測(cè)比較方便合適。望賜教！ |
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麥子果樹(shù)
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2樓2015-10-23 17:47:21
Elaine4_0328
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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凱氏定氮法：蛋白轉(zhuǎn)化成銨鹽測(cè)氨，125-1250ug/ml，干擾物質(zhì)：非蛋白氨 BCA法：蛋白還原Cu++為Cu+后與BCA試劑發(fā)生紫紅色反應(yīng),25-2000ug/ml，干擾物質(zhì)：巰基乙醇、蔗糖，EDTA等 Bradford法：蛋白染料藍(lán)色反應(yīng),125-1000ug/ml，干擾物質(zhì)：堿性溶液 Lowry法：蛋白與Cu++酚試劑藍(lán)色反應(yīng), 10-100ug/ml，干擾物質(zhì)：某些氨基酸、非離子表面活性劑、蔗糖等 A280nm紫外吸收波長(zhǎng)法：酪氨酸、色氨酸光吸收,100-1000ug/ml，干擾物質(zhì)：核酸類(lèi)、酚類(lèi) A215-A225差值比較法：經(jīng)驗(yàn)公式 都是可以用的方法。你分別查查你的凍干粉的組成，以及實(shí)驗(yàn)室能用的試劑、儀器等 |
3樓2015-11-13 11:09:41
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