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919547443金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)中氨基酸組分是如何分析的? 已有1人參與
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| 蛋白質(zhì)中氨基酸組分是如何分析的?用什么儀器?怎么處理樣品? |
木蟲 (著名寫手)

至尊木蟲 (職業(yè)作家)
金蟲子

| 采用經(jīng)典的陽離子交換色譜分離、茚三酮柱后衍生法,對蛋白質(zhì)水解液及各種游離氨基酸的組分含量進行分析。儀器基本結(jié)構(gòu)同普通HPLC相似,但針對氨基酸分析進行了細節(jié)優(yōu)化(例如氮氣保護、惰性管路、在線脫氣、洗脫梯度及柱溫梯度控制等等) 通常細分為兩種系統(tǒng):蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng)),利用不同濃度和pH值的檸檬酸鈉或檸檬酸鋰進行梯度洗脫。其中鈉鹽系統(tǒng)一次最多分析約25種氨基酸,速度較快,基線平直度好;鋰鹽系統(tǒng)一次最多分析約50種氨基酸,速度較慢,基線一般不如鈉鹽系統(tǒng)好。 分析效果:從目前已知的氨基酸分析方法比較來看,除靈敏度(即最低檢測限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:<0.5pmol;氨基酸分析儀:<10pmol),其他如分離度、重現(xiàn)性、操作簡便性、運行成本等方面,都優(yōu)于其他分析方法 |
金蟲 (正式寫手)

禁蟲 (著名寫手)
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