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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 藍莓RNA提取的一點經驗
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[交流]
藍莓RNA提取的一點經驗 已有6人參與
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本人新近做RNA提取，養(yǎng)得藍莓，前后兩個月了，用了生工、天根、sigma的專門針對植物RNA提取試劑盒，都失敗了，之前提三葉草的倒是一次性成功的。一個是產量太低，完全按試劑盒操作，檢測只有50 ng/ul左右，雜質也多。十幾次的失敗，對一個研三的人幾乎是要放棄的了。 后來老板要求我再試試，用CTAB法，因實驗室條件簡陋，就從網上買的試劑，按照大家分享的方法提了一次試試，一遍成功。 一共做了兩個樣，一個濃度100左右，260/280=2.12，260/230=2.57，另一個失敗了。不管怎么說，兩個月來第一次提出來，網上也沒有提藍莓RNA的分享，摸索這么久，給有緣人看見，希望能少走彎路。無論藍莓葉片還是果實，直接用CTAB法吧，當然，有時間也可以試試別的，我終于要解脫了 |
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chenqiberg
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5樓2016-05-16 23:16:44
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6樓2016-05-16 23:18:24
阿發(fā)貝塔
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請教一下，您CTAB法提RNA加樣品多少克，裂解液多少克？可不可以分享一下樓主的試劑怎么配的，用沒用DEPC處理？之前我用10毫升離心管里加4毫升裂解液，0.8克左右樣品，抽提離心中間有白色隔層，吸取上清液繼續(xù)抽提，最后得到的RNA電泳都降解了只有一條5S條帶，濃度也只有30左右。后來準備加大量，昨天提取魔芋球莖總RNA 但是加了2克樣品15毫升裂解液在50毫升離心管，抽提完畢離心后，居然沒有上清液，上層只有大量白色絮狀物，下層液 體。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2016-11-23 09:55:33
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